Тонкослойная хроматография (ТСХ). Хроматография тсх


Тонкослойная хроматография (ТСХ)

Подробности Опубликовано 14 Сентябрь 2013 Автор: Administrator

Тонкослойная хроматография – способ анализа (реже препаративного разделения) смесей жидких или твердых веществ, основанный на различном сродстве разделяемых веществ к неподвижной (сорбент) и подвижной (элюент) фазам. Как правило, чем лучше вещество сорбируется неподвижной фазой - тем медленнее вещество двигается по пластине. Тонкослойная хроматография чрезвычайно чувствительный метод, позволяет обнаруживать до ~0.5 масс.-% примесей.

Область применения

  1. Анализ смесей жидких или твердых веществ, различающихся по Rf.
  2. Анализ реакционных смесей, мониторинг протекания химических реакций.

  3. Определение чистоты конечного продукта.

Оборудование

Типичный прибор для проведения ТСХ анализа приведен на рисунке:

ТСХ анализ
  1. Капилляр. Представляет собой стеклянную трубку с внутренним диаметром 0.3-1.0 мм, вытянутую в пламени(см. Видеоурок по вытягиванию капилляра, Важно! Оба конца капилляра должны быть открыты). Края капилляра должны быть ровными, чтобы не царапать слой сорбента и при легком прикосновении переносить раствор вещества на пластину. Важно! Чем уже капилляр, тем легче получить небольшое пятно вещества на пластине. В качестве капилляра также удобно использовать насадки для пипетмана (см. фото выше).
  2. Ёмкость для ТСХ. Химический стакан с плоским дном, на дно которого наливается элюент слоем 4-6 мм. Для воспроизводимых результатов дно и стенки емкости выкладываются фильтровальной бумагой, которая пропитывается элюентом. Емкость закрывается крышкой (или чашкой Петри, часовым стеклом) для избежания испарения элюента.

  3. Элюент.

      1. Выделяемые вещества не должны взаимодействовать с элюентом или разрушаться в его присутствии. Пример: гидролиз эпоксидов или ацеталей водой на силикагеле.

      2. Элюент может быть или индивидуальным растворителем или смесью нескольких растворителей. Растворители должны легко удаляться после проведения анализа (поэтому диметилсульфоксид (ДМСО) или диметилформамид (ДМФА) не подходят из-за высокой температуры кипения).

      3. Элюент подбирают таким образом, чтобы пятно целевого вещества выходило с Rf не более 0.5-0.6 после одного прогона хроматограммы и было хорошо дифференцировано от примесей (~0.1 Rf). Если на старте остались еще вещества (Rf = 0, "сидят на старте"), следует сменить элюент и проанализировать состав этой смеси. Иногда целевое вещество может "сидеть на старте".

      4. Если под действием растворителей различной полярности (полярных (метанол, возможно с добавлением уксусной кислоты или триэтиламина) и неполярных (гексан, пентан)) вещество не сдвигается со старта или двигается с фронтом, следует перейти к другому сорбенту. Пример: Rf = 0, так ведут себя высоко полярные вещества (ионные жидкости, амины) на силикагеле; или неполярные вещества на сорбентах с обращенной фазой. Пример: Rf = 1, так ведут себя неполярные вещества на силикагеле; или высоко полярные вещества (ионные жидкости, амины) на сорбентах с обращенной фазой. Ряд растворителей по полярности см. здесь.
    • Количество элюента. Элюент наливается в емкость до образования слоя 4-6 мм. Важно! Пластину погружают в элюент так, чтобы пятна веществ не соприкасались непосредственно с элюентом, иначе произойдет вымывание веществ в элюирующую смесь.

  4. Сорбент. Выбирается исходя из свойств разделяемой смеси.
    • Требования к сорбенту.
      1. Разделяемые вещества не должны разрушаться в присутствии сорбента. Пример: разделение и очистка ацеталей на силикагеле (у него кислая реакция) практически невозможна из-за их разрушения. В то время как на нейтральном Al2O3 их удается эффективно разделить. См. также как с помощью ТСХ определить разлагается ли вещество на данном сорбенте.
      2. Если под действием растворителей различной полярности (полярных (метанол, возможно с добавлением уксусной кислоты или триэтиламина) и неполярных (гексан, пентан)) вещество не сдвигается со старта или двигается с фронтом, следует перейти к другому сорбенту (от полярного сорбента к неполярному и наоборот). Пример 1: Rf = 0, так ведут себя высоко полярные вещества (ионные жидкости, амины) на силикагеле; или неполярные вещества на сорбентах с обращенной фазой. Пример 2: Rf = 1, так ведут себя неполярные вещества на силикагеле; или высоко полярные вещества (ионные жидкости, амины) на сорбентах с обращенной фазой.

  5. Пластина.

    1. Ширина пластины определяется: по 5 мм от краев пластины, и 4-6 мм расстояние между пятнами. Длина пластины: от 5 см (для хорошо разделяющихся веществ) до 10 см или более (для сложных смесей).

    2. Линия "старта" проводится карандашом на расстоянии 5-7 мм от нижнего края пластины, с этого же края отрезаются уголки (~2 мм) для того, чтобы фронт элюента шел по пластине ровным слоем.

    3. Вещество наносится на пластину в виде раствора с достаточно небольшой концентрацией (иначе возможна "перегрузка пластины", т.е. вещества будут выходить длинной растянутой линией, не разделяясь) при помощи капилляра. Диаметр пятен 3-5 мм. При мелких пятнах <2 мм вещество на пластине сильно концентрировано, в результате - плохое разделение. При больших пятная >6 мм - вещество сильно размывается при элюировании затрудняя дифференциацию пятен.

    4. При анализе фракций колоночной хроматографии. Пятна нумеруют. Если все фракции не помещаются на одну пластину, то последняя фракция с предыдущей пластины также наносится на текущую пластину - для сравнения. Пример: на 1 пластине наносят фракции с 1 по 10, на второй с 10 по 19, на третьей с 19 по 28 и т.д.

    5. Линия "финиша" проводится карандашом после окончания элюирования на расстоянии 3-5 мм от верхнего края пластины. Важно! Для воспроизводимых результатов фронт элюента не должен достигать края пластины.Типичную ТСХ пластину после проведения анализа и проявления пятен можно посмотреть ниже:Пример:

      Посмотреть

      ТСХ пластина. Фотограф: Admin
  6. Обнаружение пятен.Большинство органических соединений не окрашены, т.о. не удается визуально определить положение пятен на пластине. Поэтому, после проведения ТСХ анализа требуется проявить пятна в ультрафиолетовом свете (УФ), йоде (I2) или под действием специальных реагентов. Подробнее читайте в разделе Обнаружение веществ при тонкослойной (ТСХ) и колоночной (КХ) хроматографии.

Рекомендации при проведении

  1. Если при помещении пластины в емкость фронт элюента пошел неровно, следует вынуть пластину, выровнять нижний край ножницами и поместить пластину в емкость снова.

  2. Для воспроизводимых результатов элюент для каждого ТСХ анализа следует готовить заново. Так как растворители испаряются.

  3. Для тщательного анализа смеси нескольких веществ можно использовать градиентное элюирование, т.е. (на примере хроматографии на силикагеле), начинать элюировать неполярными растворителями (пентан, гексан), далее постепенно увеличивать полярность смеси (смеси: гексан/этилацетат от 20:1 до 1:5) и, наконец, переходить к высоко полярным растворителям и смесям (метанол, смеси метанол/триэтиламин 20:1).

orgchemlab.com

Тонкослойная хроматография. Достоинства и недостатки

Тонкослойная хроматография (ТСХ) – один из наиболее популярных методов хроматографического анализа при создании, производстве и контроле качества лекарственных препаратов. Такая широкая популярность метода обусловлена рядом существенных преимуществ тонкослойной хроматографии по сравнению с другими методами хроматографического анализа.

    1. Достоинства метода тонкослойной хроматографии

Экспрессность

Приготовление пробы для качественной ТСХ может уложиться в 1 минуту, для количественной – 5 – 10 минут (в отдельных сложных случаях может потребоваться до получаса). Элюция хроматограммы (в старых источниках литературы по хроматографии – проявление) в зависимости от состава элюента (подвижной фазы), длины хроматограммы и сорбента – от 5 до 30 минут. В большинстве случаев отсутствует необходимость в предварительной пробоподготовке (фильтрование, обезвоживание, концентрирование и т.д.), во многих случаях она может быть осуществлена на той же пластинке, на которой проводится анализ.

Униерсальность

ТСХ предоставляет возможность разделения многих образцов и многомерного элюирования при различных условиях. На одной и той же пластинке путем простой смены элюента (переставляем пластинку из одной камеры в другую) можно проводить двумерное элюирование можно комбинировать не только два разных элюента, но и даже тип хроматографии, например, адсорбционную и распределительную. В промежутке между двумя элюированиями можно провести обработку пластинки парами кислого или основного рагента и поменять степень ионизации компонентов изучаемой смеси.

Расход анализируемого вещества

Количество вещества, необходимое для проведения анализа в зависимости от чувствительности обнаружения и конкретных задач анализа составляет в большинстве случаев 1 – 500 мкг, причем при необходимости это количество вещества можно “вернуть”.

Простота техники ТСХ

Для освоения техники проведения анализа достаточно проведения 5 – 6 анализов (менее 1 рабочего дня) под руководством специалиста.

Наглядность и информативность

За исключением бумажной хроматографии ни один другой вид хроматографии не может конкурировать с ТСХ по этому параметру. Обработка хроматограммы различными реактивами не только позволяет установить расположение пятен (при анализе неокрашенных соединений), но может дать ценную информацию о химической природе обнаруживаемых веществ по специфической окраске пятен до и после применения того или иного реактива. В арсенале ТСХ имеется сотни различных реактивов на многие классы органических веществ. При использовании определенной техники работы одну и ту же хроматограмму можно обрабатывать последовательно несколькими реактивами на разные функциональные группы, что позволяет надежно дифференцировать даже близкие по структуре вещества одного класса.

Простота протоколирования результатов

Часто сама хроматограмма после опрыскивания специальным акрилатным клеем (можно заменить “простым” лаком для волос – без витаминных и прочих добавок – из личного опыта автора) может храниться несколько лет в качестве “живого свидетеля” анализа. При получении окрашенных пятен можно применить фотокопирование (“снять ксерокс”), сканирование или фотографирование хроматограммы (если пятна отдельных веществ неокрашены, а видны под ультрафиолетом, то эти пятна предварительно обводят карандашом в УФ-свете, после чего применяют методы копирования). Раньше применяли перерисовку хроматограммы на кальку.

Простота оборудования

Минимальный комплект оборудования для ТСХ состоит из пластинки (в продаже имеются готовые пластинки для ТСХ), ножниц, набора стеклянных капиллиров (могут быть с легкостью изготовлены самостоятельно), микропипеток, стеклянной камеры с крышкой, мягкого карандаша (исключительно графитовый – “простой карандаш”!, в старых руководствах рекомендуют “мягкий свинцовый карандаш), линейки (с милиметровыми делениями), пинцета, фильтровальной бумаги, источника УФ-света (как правило – со светофильтрами в 254 и 365 нм) и нескольких пульверизаторов для опрыскивания хроматограммы растворами реактивов.

Стоимость

ТСХ является самым дешевым методом анализа органических веществ. Общая стоимость указанного комплекта оборудования (если использовать в качестве источника УФ-света маломощные бытовые малогабаритные УФ-лампы) и приспособлений может уложиться в 500 – 1000 грн (для сравнения – самый дешевый жидкостный хроматограф стоит около 10 тыс долларов США). Несмотря на то, что для ТСХ необходимы чистые растворители, их стоимость не может сравниться со стоимостью растворителей для ВЭЖХ. Зачастую достаточной является обычная перегонка продажного растворителя марки “ч” (“чистый”). Таким образом, в самом дорогом варианте ТСХ-анализ обходится в сумму, не превышающей 5 – 10 грн, причем львиную долю этой суммы “съедает” собственно сама пластинка.

studfiles.net

Тонкослойная хроматография (ТСХ) — Мегаобучалка

ТСХ представляет собой разновидность адсорбционной хрома­тографии, когда разделение происходит на "открытых колонках", т.е. в тонком слое адсорбента, нанесенного на твердую основу (например, стеклянную пластинку). Преимуществами ТСХ являются высокая скорость хроматографирования и высокая чувствитель­ность (достаточно микроколичества разделяемых веществ). ТСХ получила очень широкое распространение и в настоящее время яв­ляется неотъемлемым методом любой органической лаборатории. [2]

Приготовление пластин

В настоящее время существуют две основные разновидности это­го метода, которые, по существу, различаются лишь способом при­готовления тонкого слоя адсорбента: хроматография на закреплен­ном и на незакрепленном слое адсорбента.

По способу, разработанному Шталем, тонкий слой адсорбента получают, нанося на стеклянную пластинку кашеобразную смесь адсорбента, связующего вещества и воды. Этот вид ТСХ носит на­звание хроматографии в закрепленном слое. Чаще всего в качестве адсорбентов для приготовления закрепленных слоев используется Аl2О3 и силикагель. В качестве связующего вещества обычно применяют сульфат кальция (смесь силикагеля с 5% СаSО4 выпускается фирмой "Мерк" под названием кизельгель Г). В последнее время широкое распространение получила хроматография на пластинках "Silufol", представляющих собой пластинки из алюминиевой фольги, на которых закреплен слой силикагеля (обычно 0,4-0,6 мм). [5]

При втором способе приготовления пластинок (с незакреплен­ным слоем) сухой адсорбент равномерно распределяется с помощью стеклянной палочки на пластинке. На оба конца стеклянной палоч­ки приклеены полоски, толщина которых (0,1 мм) соответствует толщине выбранного слоя адсорбента (намазывать, а не раскаты­вать!). Перед нанесением адсорбент очищают от крупных частичек, которые при хроматографировании могли бы дать неровности на поверхности адсорбента. Для этого адсорбент просеивают в сосуд для хранения через тонко сито (капрон). [3]

Нанесение веществ

Анализируемые смеси веществ по возможности наносят в виде 1%-ных растворов (следует применять неполярные легко летучие растворители). Раствор испытуемой смеси наносят на пластинку (на линию старта) тонким стеклянным капилляром на расстоянии 1-2 см друг от друга. Пятна веществ по возможности должны быть не­большими (диаметр 2-3 мм) и находиться не ближе 1,5-2 см от краев пластинки (рис. 2).

 

Рис.2. Пример хроматографической пластинки

 

 

Элюирование проводят в плотно закрытой камере. Пластинки погружают в жидкость (элюент) на 5-6 мм (следить, чтобы раство­ритель не касался линии старта). Пластинки с закрепленным слоем адсорбента устанавливают практически вертикально. Для пласти­нок с незакрепленным слоем применяют плоские камеры (малый угол наклона пластинки). Элюирование проводят в течение време­ни, необходимого для продвижения фронта растворителя практиче­ски до края пластинки (следить, чтобы растворитель "не убежал" за край). [4]

Следует отметить, что существуют технические приемы, позво­ляющие организовать хроматографирование в тонком слое (закрепленном) как с восходящим, так и с нисходящим фронтом растворителя.

После хроматографирования отмечают фронт растворителя, пластинки высушивают на воздухе и проявляют пятна веществ, если они не являются окрашенными. Положение пятен некоторых бес­цветных веществ можно установить при рассмотрении пластинок в УФ-свете, если использовать специально подготовленный адсорбент (с УФ-индикатором). В большинстве случаев удается сделать хроматографические пятна видимыми путем обработки их парами иода. Для этого хроматограмму помещают в закрытый сосуд (например, эксикатор), в котором находится кристаллик иода. Вещество прояв­ляется в виде коричневого пятна. Для проявления пятен неокрашен­ных веществ применяют, кроме того, опрыскивание соответствую­щими реагентами. Пластинки с незакрепленным слоем целесообразно опрыскивать влажными, так как при опрыскивании их в сухом состоянии незакрепленный слой адсорбента может быть легко разрушен. [1]

Количественной характеристикой хроматографической подвиж­ности каждого вещества (пятна) является коэффициент подвижности Rf, рассчитанный из соотношения:

 

 

 

Где h– длина пробега соответствующего пятна (измеренная в мм от линии старта до центра пятна), X – длина пробега фронта растворителя.

Коэффициент подвижности является индивидуальной характери­стикой вещества, определяемой степенью адсорбции и зависящей от природы адсорбента и состава элюента. Поэтому при оформлении результатов следует указывать эти условия хроматографирования, например Rf = 0,19 (А12O3, ССl4). [3]

ТСХ может быть использована для следующих целей:

1. Определение качественного состава смеси веществ. Для этого на линию старта наносится исследуемая смесь и в качестве свидете­лей предполагаемые вещества (см рис. 2) Сравнивая Rf веществ, образующих исследуемую смесь, с Rf свидетелей, устанавливают, из каких соединений состоит смесь.

2. Препаративное разделение смеси веществ. В этом случае исполь­зуется ТСХ с незакрепленным слоем адсорбента. На линию стар­та наносят (полосой) исходную смесь (количество ее ограничивается емкостью адсорбента). После элюирования зоны, соответст­вующие отдельным компонентам смеси, собирают и вещества десорбируют с адсорбента подходящим растворителем. Недостат­ком этого способа разделения веществ является количественное ограничение ТСХ. Поэтому препаративное разделение смеси ве­ществ обычно осуществляют методом колоночной хроматогра­фии (см. ниже). Однако с помощью ТСХ, как правило, проводят подбор условий (выбор адсорбента, состава элюента) для коло­ночного хроматографирования.

3. ТСХ как модель колоночной хроматографии. В соответствии с химической природой разделяемых веществ подбирают подхо­дящий адсорбент. Для модельного разделения методом ТСХ и последующего разделения на колонке следует использовать ад­сорбент, изготовленный одной и той же фирмой (различие в раз­мерах частиц адсорбента при препаративном разделении сущест­венного значения не имеет). Состав элюента подбирают, добива­ясь максимального разделения пятен. Для этого, как правило, состав элюента изменяют в сторону увеличения полярности. Следу­ет помнить, что чем ниже полярность элюента, тем больше раз­личие в хроматографической подвижности веществ, тем эффек­тивнее их разделение. Хотя скорость хроматографирования в этом случае низкая, но лучше пожертвовать временем, чем каче­ством разделения (или очистки) веществ. Следует отметить, что для эффективного использования на колонке важно, чтобы большинство компонентов, входящих в состав смеси, в условиях ТСХ имело величины Rf не более 0,3.

4. Наконец, ТСХ может быть использована в органическом синтезе для экспресс-контроля за ходом реакции. Для этого на линию старта наносится реакционная смесь (в любой момент реакции) и в качестве свидетелей - исходное соединение и конечный продукт реакции. Особенно удобно использовать для этих целей пластин­ки Silufol, предварительно только подобрав элюент, позволяю­щий дифференцировать исходные и конечные соединения. [3]

megaobuchalka.ru

Тонкослойная хроматография (ТСХ)

Подробности Опубликовано 14 Сентябрь 2013 Автор: Administrator

Тонкослойная хроматография – способ анализа (реже препаративного разделения) смесей жидких или твердых веществ, основанный на различном сродстве разделяемых веществ к неподвижной (сорбент) и подвижной (элюент) фазам. Как правило, чем лучше вещество сорбируется неподвижной фазой - тем медленнее вещество двигается по пластине. Тонкослойная хроматография чрезвычайно чувствительный метод, позволяет обнаруживать до ~0.5 масс.-% примесей.

Область применения

  1. Анализ смесей жидких или твердых веществ, различающихся по Rf.
  2. Анализ реакционных смесей, мониторинг протекания химических реакций.

  3. Определение чистоты конечного продукта.

Оборудование

Типичный прибор для проведения ТСХ анализа приведен на рисунке:

ТСХ анализ
  1. Капилляр. Представляет собой стеклянную трубку с внутренним диаметром 0.3-1.0 мм, вытянутую в пламени(см. Видеоурок по вытягиванию капилляра, Важно! Оба конца капилляра должны быть открыты). Края капилляра должны быть ровными, чтобы не царапать слой сорбента и при легком прикосновении переносить раствор вещества на пластину. Важно! Чем уже капилляр, тем легче получить небольшое пятно вещества на пластине. В качестве капилляра также удобно использовать насадки для пипетмана (см. фото выше).
  2. Ёмкость для ТСХ. Химический стакан с плоским дном, на дно которого наливается элюент слоем 4-6 мм. Для воспроизводимых результатов дно и стенки емкости выкладываются фильтровальной бумагой, которая пропитывается элюентом. Емкость закрывается крышкой (или чашкой Петри, часовым стеклом) для избежания испарения элюента.

  3. Элюент.

      1. Выделяемые вещества не должны взаимодействовать с элюентом или разрушаться в его присутствии. Пример: гидролиз эпоксидов или ацеталей водой на силикагеле.

      2. Элюент может быть или индивидуальным растворителем или смесью нескольких растворителей. Растворители должны легко удаляться после проведения анализа (поэтому диметилсульфоксид (ДМСО) или диметилформамид (ДМФА) не подходят из-за высокой температуры кипения).

      3. Элюент подбирают таким образом, чтобы пятно целевого вещества выходило с Rf не более 0.5-0.6 после одного прогона хроматограммы и было хорошо дифференцировано от примесей (~0.1 Rf). Если на старте остались еще вещества (Rf = 0, "сидят на старте"), следует сменить элюент и проанализировать состав этой смеси. Иногда целевое вещество может "сидеть на старте".

      4. Если под действием растворителей различной полярности (полярных (метанол, возможно с добавлением уксусной кислоты или триэтиламина) и неполярных (гексан, пентан)) вещество не сдвигается со старта или двигается с фронтом, следует перейти к другому сорбенту. Пример: Rf = 0, так ведут себя высоко полярные вещества (ионные жидкости, амины) на силикагеле; или неполярные вещества на сорбентах с обращенной фазой. Пример: Rf = 1, так ведут себя неполярные вещества на силикагеле; или высоко полярные вещества (ионные жидкости, амины) на сорбентах с обращенной фазой. Ряд растворителей по полярности см. здесь.
    • Количество элюента. Элюент наливается в емкость до образования слоя 4-6 мм. Важно! Пластину погружают в элюент так, чтобы пятна веществ не соприкасались непосредственно с элюентом, иначе произойдет вымывание веществ в элюирующую смесь.

  4. Сорбент. Выбирается исходя из свойств разделяемой смеси.
    • Требования к сорбенту.
      1. Разделяемые вещества не должны разрушаться в присутствии сорбента. Пример: разделение и очистка ацеталей на силикагеле (у него кислая реакция) практически невозможна из-за их разрушения. В то время как на нейтральном Al2O3 их удается эффективно разделить. См. также как с помощью ТСХ определить разлагается ли вещество на данном сорбенте.
      2. Если под действием растворителей различной полярности (полярных (метанол, возможно с добавлением уксусной кислоты или триэтиламина) и неполярных (гексан, пентан)) вещество не сдвигается со старта или двигается с фронтом, следует перейти к другому сорбенту (от полярного сорбента к неполярному и наоборот). Пример 1: Rf = 0, так ведут себя высоко полярные вещества (ионные жидкости, амины) на силикагеле; или неполярные вещества на сорбентах с обращенной фазой. Пример 2: Rf = 1, так ведут себя неполярные вещества на силикагеле; или высоко полярные вещества (ионные жидкости, амины) на сорбентах с обращенной фазой.

  5. Пластина.

    1. Ширина пластины определяется: по 5 мм от краев пластины, и 4-6 мм расстояние между пятнами. Длина пластины: от 5 см (для хорошо разделяющихся веществ) до 10 см или более (для сложных смесей).

    2. Линия "старта" проводится карандашом на расстоянии 5-7 мм от нижнего края пластины, с этого же края отрезаются уголки (~2 мм) для того, чтобы фронт элюента шел по пластине ровным слоем.

    3. Вещество наносится на пластину в виде раствора с достаточно небольшой концентрацией (иначе возможна "перегрузка пластины", т.е. вещества будут выходить длинной растянутой линией, не разделяясь) при помощи капилляра. Диаметр пятен 3-5 мм. При мелких пятнах <2 мм вещество на пластине сильно концентрировано, в результате - плохое разделение. При больших пятная >6 мм - вещество сильно размывается при элюировании затрудняя дифференциацию пятен.

    4. При анализе фракций колоночной хроматографии. Пятна нумеруют. Если все фракции не помещаются на одну пластину, то последняя фракция с предыдущей пластины также наносится на текущую пластину - для сравнения. Пример: на 1 пластине наносят фракции с 1 по 10, на второй с 10 по 19, на третьей с 19 по 28 и т.д.

    5. Линия "финиша" проводится карандашом после окончания элюирования на расстоянии 3-5 мм от верхнего края пластины. Важно! Для воспроизводимых результатов фронт элюента не должен достигать края пластины.Типичную ТСХ пластину после проведения анализа и проявления пятен можно посмотреть ниже:Пример:

      Посмотреть

      ТСХ пластина. Фотограф: Admin
  6. Обнаружение пятен.Большинство органических соединений не окрашены, т.о. не удается визуально определить положение пятен на пластине. Поэтому, после проведения ТСХ анализа требуется проявить пятна в ультрафиолетовом свете (УФ), йоде (I2) или под действием специальных реагентов. Подробнее читайте в разделе Обнаружение веществ при тонкослойной (ТСХ) и колоночной (КХ) хроматографии.

Рекомендации при проведении

  1. Если при помещении пластины в емкость фронт элюента пошел неровно, следует вынуть пластину, выровнять нижний край ножницами и поместить пластину в емкость снова.

  2. Для воспроизводимых результатов элюент для каждого ТСХ анализа следует готовить заново. Так как растворители испаряются.

  3. Для тщательного анализа смеси нескольких веществ можно использовать градиентное элюирование, т.е. (на примере хроматографии на силикагеле), начинать элюировать неполярными растворителями (пентан, гексан), далее постепенно увеличивать полярность смеси (смеси: гексан/этилацетат от 20:1 до 1:5) и, наконец, переходить к высоко полярным растворителям и смесям (метанол, смеси метанол/триэтиламин 20:1).

orgchemlab.com

Тонкослойная хроматография - PharmSpravka

 

 

Метод хроматографии в тонком слое сорбента применили в фармацевтическом анализе для разделения экстрактов и насто­ек лекарственных растений советские ученые Н. А. Измайлов и М. С. Шрайдер (1938).

Метод ТСХ дает возможность разделять смеси лекарствен­ных веществ, идентифицировать их, устанавливать чистоту и осуществлять количественное определение компонентов.

ТСХ имеет то преимущество, что позволяет разделять слож­ные лекарственные смеси на отдельные компоненты, близкие по химической структуре и свойствам, например смеси аминокис­лот, алкалоидов, барбитуратов, сульфаниламидов и др.

Особенно удобен этот метод для анализа малых количеств ядовитых и сильнодействующих веществ в прописи, когда опре­деление их химическими методами затруднено. Этот метод при­меняется и для обнаружения примесей в веществе, что особен­но важно в промышленном производстве постадийного контро­ля качества промежуточных продуктов синтеза.

К преимуществам этого метода относится и то, что он не требует сложного оборудования и поэтому доступен при раз­личных исследованиях в любых условиях.

Метод ТХС осуществляется в двух модификациях - с за­крепленным и незакрепленным слоем сорбента. При этом нахо­дят применение более двадцати различных сорбентов, из них чаще используют оксид алюминия, различные марки силикаге-ля, целлюлозу, полиамидный порошок, синтетические смолы и другие сорбенты.

В последние годы стали широко применяться готовые пла­стинки «Силуфол» с закрепленным слоем сорбента (производ­ство ЧССР).

Процесс хроматографирования сводится к следующему. На стеклянную пластинку (размером 6x9 см; 12x16 см или др.) с закрепленным или незакрепленным слоем сорбента или на пластинку «Силуфол» на линию старта наносят при помощи ка­пилляра раствор исследуемого вещества или смеси веществ и пластинку под углом помещают в специальную камеру (четы­рехугольная стеклянная банка с притертой крышкой) со смесью

Тонкослойная хроматография (1)

 

соответствующих раствори­телей (система). Эти рас­творители вследствие капил­лярности слоя сорбента пе­ремещаются по пластинке, увлекая нанесенные на ли­нию старта вещества из сме­си на различные расстояния.

После прохождения рас­творителя на заданную вы­соту пластинку вынимают из камеры, подсушивают и проявляют с помощью соот­ветствующих химических ре­активов.

Вещества на хромато-грамме можно обнаружить и по флюоресценции в УФ-

свете    (применяют   ультрафиолетовые   лампы   различных си­стем).

Положение пятен веществ по окончании хроматографирова-ния характеризуется значением Rf - Ratio of Fronts (от англ. Rate - соотношение и Fronts - фронт).

 

где: АС - расстояние от линии старта до центра пятна вещест­ва, АВ - расстояние, пройденное фронтом растворителя от ли­нии старта (рис. 8).

Значение Rf для каждого вещества вполне определенно и является характерной величиной; по значению Rf идентифици­руются вещества смеси.

Поскольку значение Rf в значительной степени зависит от качества сорбентов, чистоты растворителей, температуры, насы­щенности камер и других факторов, для большей достоверно­сти результата анализа применяют «свидетели» - стандартные растворы аналогичных веществ смеси, которые наносят на ли­нию старта пластинки параллельно с пробой анализируемой смеси веществ. При одинаковом значении Rf исследуемых ве­ществ смеси и «свидетелей» идентификация считается положи­тельной. Для количественной оценки того или другого компо­нента смеси поступают двояко: окрашенную зону вещества осторожно удаляют с пластинки, затем определяемое вещество элюируют с сорбента соответствующими растворителями. Опре­деление вещества в элюате проводят спектрофотометрически или фотометрически.

Можно количественное содержание компонентов смеси опре­делять непосредственно на хроматограммах.

В этом случае используют два способа: 1) визуально сравни­вают интенсивности окраски пятен веществ исследуемой смеси с аналогичными пятнами «свидетелей»; при этом площади пятен измеряют планиметрически или вычисляют по радиусам зон веществ, используя формулу:

S=ni?-i?1,

где S-площадь пятна, мм2; R и Ri - наибольший и наимень­ший радиусы зон, мм; я=3,14;

2) измеряют интенсивность окраски пятен денситометриче-ски или спектрофотометрически непосредственно на хромато-грамме, пользуясь денситометрами, спектрофотометрами специ­ального устройства.

27.06.2015

www.pharmspravka.ru

Хроматография тонкослойная - Справочник химика 21

    Адсорбционная хроматография. Тонкослойная хроматография [c.269]

    Если сорбент помещен не в колонке, а в виде тонкого слоя на пластинке, то мы получим один из вариантов хроматографии — тонкослойную хроматографию (ТСХ). [c.120]

    Тонкослойная хроматография. Тонкослойная хроматография — эффективный метод анализа сложных смесей веществ различных классов — углеводородов, спиртов, кислот, белков, углеводов, стероидов и т. д. Она заключается в следующем. На одну сторону небольшой стеклянной пластинки с помощью специального валика наносят тонкий слой сорбента. На стартовую линию слоя сорбента наносят пробы веществ и их смесей край пластинки ниже стартовой линии погружают в систему растворителей, налитую в широкий сосуд с пришлифованной крышкой. За счет капиллярных сил растворитель продвигается по пластинке. По мере продвижения жидкости по пластинке смесь веществ разделяется. Границу подъема жидкости или линию фронта отмечают, пластинку сушат и проявляют. Отмечают, как указано на рис. 85, положение пятен, соответствующих исследуемым веществам и находя- [c.73]

    Тонкослойная хроматография. Тонкослойная хроматография применяется при разделении очень малых количеств веществ на небольшом слое адсорбента за короткое время. Существуют два способа приготовления тонкого слоя сорбента — в закрепленном и незакрепленном слое. В качестве сорбента для приготовления закрепленных слоев применяют оксид магния, оксид алюминия, оксид кальция, карбонат магния, силикагель в смеси со связывающими компонентами. Связывающими веществами могут служить сульфат кальция, рисовый крахмал и вода. При приготовлении хроматографической пластинки с закрепленным слоем адсорбента на стеклянную пластинку (9 X 12 см, 13 X 7 см) наносят в виде кашицы смесь адсорбента со связующим веществом (5% от массы адсорбента) и водой. С помощью специального валика равномерно раскатывают эту смесь и делают слой толщиной 2 мм, затем пластинку высушивают при ПО—120°С. После этого на пластинке не должно быть трещин. При работе на тонком, незакрепленном слое можно использовать различные адсорбенты (наибольшее значение имеет оксид алюминия и силикагель). Для приготовления тонкого, незакрепленного слоя можно воспользоваться такими же стеклянными пластинками, как это описано выше. На пластинку насыпают слой сорбента, равномерно раскатывают его валиком, слегка прижимая к стеклу, снимая при этом избыток. Валик можно сделать из стеклянной палочки диаметром 8—10 мм и длиной несколько большей, чем ширина пластинки. На концы палочки надевают резиновые трубочки (длиной 1 см). Толщину их стенок подбирают так, чтобы при накатывании адсорбента образовывался слой до 1 мм. Трубочки должны находиться на таком расстоянии, чтобы после проведения валиком по пластинке оставались свободные от адсорбента полосы. Можно валик сделать металлический, причем он должен накладываться на пластинку для закрепления ее во время нанесения адсорбента удобно пользоваться специальным приспособлением (рис. 20). [c.27]

    Идентификация отдельных групп или смесей анионоактивных ПАВ можеФ быть осуществлена по ИК-спектрам (каталоги соответствующих спектров приведены в работах [12, 13, 409]), данным эмиссионного или атомно-абсорбционного анализа (состав катионов), данным элементного микроанализа (содержание С, Н, 8, N и т. д.) и метода тонкослойной хроматографии. Тонкослойная хроматография является одним их важнейших аналитических методов. В частности, приведенные в приложении 3 для двух описанных в разд. II.1.1.1 и II.1.1.2 условий хроматографирования величины и цвета пятен промышленных образцов различных групп анионоактивных ПАВ позволяют не только получить информацию о составе основного вещества ПАВ, но и оценить его чистоту. [c.179]

    В отличие от бумажной хроматографии, тонкослойная хроматография выжила, а борьба за конкуренцию с колоночной жидкостной хроматографией лишь расширила возможности ее применения во многих областях (в частности, для количественного анализа, где еще необходимы многие усовершенствования). Хотя ТСХ является одним из [c.29]

    По методическим особенностям, по технике выполнения различают хроматографию тонкослойную, бумажную, колоночную. [c.60]

    Идентификация продуктов гидролиза полисахаридов (см. гл. 14) начинается с исследования полученной смеси моносахаридов методом хроматографии на бумаге. В результате такого исследования могут быть получены очень цепные сведения о природе образовавшихся моносахаридов в ряде случаев с успехом применяются и другие виды хроматографии (тонкослойная, газо-жидкостная). Необходимо отметить, что идентификация только с помощью хроматографических методов в настоящее время невозможна, так как, во-первых, неизвестный или редко встречающийся моносахарид может быть подобен по хроматографическому поведению в избранных условиях какому-либо более распространенному представителю моносахаридов во-вторых, по данным хроматографии нельзя пока отнести моносахарид к О- или -ряду. Все это вынуждает полученные при гидролизе моносахариды после хроматографического разделения выделять в кристаллическом состоянии или переводить в кристаллические производные.  [c.493]

    В ряде случаев для оценки биологической инертности материалов необходимо осуществлять максимально полную идентификацию выделяющихся из эластомера веществ. Для оценки индивидуальных показателей изучают миграцию в модельные среды наиболее реакционноспособных и биологически активных веществ с помощью методов хроматографии (тонкослойной и газовой), фотометрии, масс-спектрометрии, проводят качественный анализ содержания химических элементов и ионов. Исследование процессов, связанных с миграцией ряда ингредиентов на поверхность резин, оказалось возможным лишь при сочетании нескольких методов - световой микроскопии, инфракрасной спектроскопии с нарушенным полным внутренним отражением (НПВО) и наиболее эффективной вследствие высокой чувствительности и избирательности тонкослойной хроматографии. [c.557]

    В настоящее время наибольшее развитие получили два хроматографических метода разделения нелетучих веществ плоскостная и колоночная хроматографии. Тонкослойная хроматография и высокоэффективная жидкостная хроматография отличаются исключительной гибкостью и широкими аналитическими возможностями. [c.151]

    Для разделения высококипящих производных формальдегида, и в частности, соединений, в виде которых он подвергается аналитическому определению, применяется распределительная хроматография (тонкослойная, бумажная и колоночная). Так, смеси альдегидов С1—Сб могут быть разделены с помощью хроматографии на бумаге после перевода в соответствующие 2,4-динитрофенил-гидразоны [280]. [c.130]

    Твердое тело Осаждение, электроосаждение, цементация, ионный обмен, сорбция, жидкостно-адсорбционная хроматография, тонкослойная хроматография, кристаллизация [c.70]

    Для отделения летучих примесей от полимеров наиболее часто используются следующие методы экстракция, растворение с последующим осаждением полимера, термическая десорбция в потоке газа-носителя и т. п. Несомненно целесообразно использовать для отделения летучих компонентов и другие эффективные, в первую очередь хроматографические, методы разделения гель-хроматографию, тонкослойную и колоночную хроматографию. В связи с большой трудоемкостью и слон ностью многостадийных методов их целесообразно использовать в тех случаях, когда более простые методы не эффективны (например, вследствие термической нестабильности полимера), или для разовых, единичных определений, когда специальная разработка простого метода не оправдана. Исключение составляют, по-видимому, только методы, в которых предварительной стадией является не процесс разделения, а разбавление анализируемого раствора полимера или растворение твердого полимера. Этот простой прием позволяет свести более сложную задачу — определение летучих компонентов в твердом полимере или [c.123]

    Более сложным и поэтому менее используемым для целей качественного анализа является другой вариант хроматографии — тонкослойная хроматография, описанная выше. В табл. П1.3—5 приведены данные для разделения на тонкослойных хроматограммах некоторых ионов различных блоков. Тонкослойная хроматография может быть использована для разделения различных окисленных форм элементов, что трудно сделать другими методами. В той же таблице приведены примеры подобного разделения. Систематическое разделение большого количества ионов этим методом пока не разработано, и чаще всего его используют для разделения небольших групп ионов. [c.287]

    Особое внимание было уделено методам определения нефтепродуктов— самого главного загрязнения наших вод. Здесь наряду с гравиметрическим методом приводятся более быстрые новые методы ИК-спектроскопии, газо-жидкостной хроматографии, тонкослойной хроматографии и др, [c.10]

    Если в первые годы использования полиамидного порошка как сорбента (1955—1960 гг.) в основном развивались методы колоночной хроматографии, то с 1960—1961 гг. начинается активное внедрение приемов и методов тонкослойной хроматографии. Тонкослойная хроматография на полиамиде является очень прогрессивным способом вследствие своей быстроты, универсальности и широкого варьирования составов систем растворителей. Но, пожалуй, одним из наиболее ценных качеств этого вида сорбента по сравнению с другими, применяемыми для тонкого слоя, является возможность полной десорбции хроматографируемых веществ, что делает этот сорбент незаменимым для количественных анализов и препаративных целей. [c.137]

    Авторы знакомят студентов с основными методами хроматографии (тонкослойной, бумажной радиальной, колоночной), широко применяемыми в настоящее время для разделения и идентификации органических соединений. В руководстве приведены также краткие сведения об использовании ИК-, УФ- и ПМР-спектров для исследования веществ. [c.3]

    Предлагаемый способ концентрирования следовых количеств органических соединений при их определении в водных растворах позволяет использовать для конечного аналитического определения методы, обладающие меньшей чувствительностью детектирования, чем газо-жидкостная хроматография (тонкослойная хроматография, спектрофотометрия и т. п.). [c.171]

    Разделение близких по свойствам РЗЭ является одной из сложных задач аналитической химии. Трудности возрастают при необходимости разделения ультрамалых количеств элементов. В этом случае на помощь приходит, наряду с бумажной хроматографией, тонкослойная хроматография, которая позволяет разделять и идентифицировать смеси РЗЭ от индикаторных до микрограммовых количеств. В табл. 6 указаны условия разделения различных комбинаций РЗЭ. [c.76]

    Тонкослойная хроматография. Тонкослойная хроматография — эффективный метод анализа сложных смесей веществ различных классов — углеводородов, спиртов, кислот, белков, углеводородов, стероидов II т. д. Она заключается в следующем. На одну сторону небольшой стеклянной пластинки с помощью специального валика наносят тонкий слой сорбента. На стартовую линию слоя сорбента наносят пробы веществ и их смесей край пластинкн ниже стартовой линии погружают в систему растворителей, налитую в широкий сосуд с пришлифованной крышкой. За счет капиллярных сил растворитель продвигается по пластинке. По мере продвижения жидкости по пластинке смесь веществ разделяется. Границу подъема жидкости, илп линию фронта, отмечают, пластинку сушат и проявляют. Отмечают, как указано па рнс. 77, положение пятен, соответствующих исследуемым веществам и находящихся между линией старта и линией фронта жидкости. Для этого измеряют расстояние от центра пятна до стартовой линии (отрезок а). Далее определяют расстояние от линии фронта жидкости до стартовой точки (отрезок Ь). Отношение отрезка а к отрезку Ь обозначают через константу / /, характеризующую положение вен1ества на данной хроматограмме. [c.70]

    Предложены разнообразные "методы анализа пестицидов с использованием газовой хроматографии, тонкослойной хроматографии, спектрофотометрии и полярографии. [c.2]

    В этой главе кратко рассматриваются только варианты колоночной жидкостной хроматографии. Методы плоскостной хроматографии — тонкослойной и бумажной — не рассматриваются, так как они описаны в соответствующих руководствах [1, 2]. Из методов колоночной жидкостной хроматографии более подробно рассматривается только особенно важный вариант жидкостной адсорбционной хроматографии. [c.413]

    Газовая хроматография успешно применяется для разделения и количественного определения малых количеств веществ в сложных смесях. Она позволяет определять растворенные в воде органические вещества в микрограммовых и даже в пикограммовых количествах. Этим и объясняется широкое применение газовой хроматографии для определения качества воды. Идентификация и количественное определение содержания примесей в воде чрезвычайно важны для контроля качества воды и устранения источников ее загрязнения. Методом газовой хроматографии при правильном выборе колонки, детектора и условий разделения можно определить любые вещества, которые испаряются без разложения или с воспроизводимым разложением. Мешающие определению вещества можно предварительно удалить с помощью жидкостно-жидкостной экстракции, жидкостной хроматографии, тонкослойной хроматографии или какого-либо другого метода. [c.368]

    Ta и Де-Вос [56] охарактеризовали четыре основных компонента товарной смеси ПХБ с применением газовой хроматографии, тонкослойной хроматографии, ЯМР- и ИК-спектроскопии. Одна газохроматографическая колонка была использована для предварительной очистки проб, а две остальные — для окончательного разделения и подтверждения идентификации. Первая колонка длиной 5 м и внутренним диаметром 6 мм (алюминиевая) была заполнена 20% SF-96 на хромосорбе W-AW. Скорость газа-носителя (азота) 75 мл/мин, температура колонки 225 °С. Выходящий из колонки элюат собирали и последовательно хроматографировали на двух остальных колонках. Первая из них (стеклянная) длиной 190 см и внутренним диаметром 3 мм содержала 3 /о 0V-1 на газохроме Q (80—100 меш). Разделение проводили при 190°С и скорости газа-носителя (азота) 80 мл/мин. Вторая колонка имела такие же размеры и разделение на ней проводили в тех же условиях, но в качестве насадки использовали 2,7% QF-1 на газохроме Q (80—100 меш.). [c.379]

    Хро.матографические Ж. а. Действие их основано на разл. сорбционной способности компонентов, входящих в состав анализируемой жидкости. Последняя фракционируется в зтих приборах, и затем разделенные компоненты детектируются посредством оптич., электро- и термохйм. и др. методов. Области применения анализ белков, антибиотиков, витаминов, углеводородов, спиртов, нуклеиновых к-т, нефти определение содержания металлов в жидких средах, бензола и толуола в сточных водах и т. д. (см. также, напр.. Жидкостная хроматография, Тонкослойная хроматография, Эксклюзионная хроматография). [c.151]

    Для количеств, определения П., тромбоксанов и их метаболитов в биол. образцах обычно используют хроматографию (тонкослойную, газо-жидкостную и высокоэффективную жидкостную) и масс-спектрометрию. Наиб, точность определения достигается сочетанием методов газо-жидгсост-ной или высокоэффективрюй жидкостной хроматографии с масс-спектрометрией. [c.111]

    Важное практич. значение имеют методы, основанные на исследовании испускания и поглощения электромагн. излучения в разл. областях спектра. К ним относится спектроскопия (напр., люминесцентный анализ, спектральный анализ), нефелометрия и турбидиметрия и др. К важным Ф.-х. м. а. принадлежат электрохим, методы, использующие измерение электрич. св-в в-ва волыпамперометрил, кондуктометрия, кулонометрия, потенциометрия и т. д.), а также хроматография (напр., газовая хроматография, жидкостная хроматография, ионообменная хроматография, тонкослойная хроматография). Успешно развиваются методы, основанные на измерении скоростей хим. р-цик (кинетические методы анализа), тепловых эффектов р-ций (термометрич. титрование, см. Калориметрия), а также на разделении ионов в магн. поле (масс-спектрометрия). [c.90]

    Для качественного и количественного анализа метрибузина предложено использовать дифференциальную пульс-полярографию после экстракции хлористым метиленом, газо-жидкостную хроматографию, тонкослойную хроматографию [494—496]. [c.118]

    Применение современных физико-химических методов разделения, анализа и контроля позволяет провести объективную оценку состава, а следовательно, и качества исходного нефтехимического, природного сырья и полупродуктов для ПАВ. Наблюдаемое в последнее время интенсивное развитие методов жидкостной адсорбционной и ионообменной хроматографии, тонкослойной и газо-жидкостной хроматографии, гелевой хроматографии, методов инфракрасной спектроскопии и масс-спектрометрии, ядерного магнитного резонанса, двухфазного и других видов титрования и т. д. открывает перед исследователями и производственниками широкие возможности. Однако возрастают трудности в выборе подходящего метода или комплекса методов, обеспечивающих наиболее рациоцальное ретаение поставленной задачи. В большой степени выбор соответствующих методов и их аппаратурного оформления определяется составом анализируемых веществ, пределами измеряемых концентраций и необходимой точностью анализа. Учитывая вышеизложенное, в перечень рекомендуемых для практического использования в производстве сырья и полупродуктов для ПАВ методов разделения, анализа и контроля включены и однотипные методы в вариантах, необходимых для применения к различным по составу анализируемым веществам. Многогранность и сложность решаемых научных и технических задач, связанных с анализом и контролем, обусловливают также необходимость рассмотрения принципиально различных методов применительно к однотипным анализируемым веществам. [c.15]

    Еще более надежными являются результаты идентификации токсичных веществ, полученные при использовании комбинации методов — ВЭЖХ и газовой хроматографии, тонкослойной хроматографии (ТСХ) и газовой, ТСХ и ВЭЖХ и др. При определении в воздухе, воде или почве обладающих выраженной канцерогенной активностью полициклических ароматических углеводородов (ПАУ) можно получить почти однозначные результаты после отделения сопутствующих (и мешающих определению) примесей — углеводороды других классов и их производные — методом ВЭЖХ или ТСХ с последующих анализом выделенных фракций методом газовой хроматографии [8]. [c.135]

    Наиболее эффективным методом исследования РТФ является хроматографическое разделение олигомеров по типам функциональности с пос. едующим измерением Мп и Мэ отдельных фракции и расчетом fл и /а, и функций РТФ. При этом выбор того или иного варианта хроматографического метода зависит от класса исследуемых олигомеров. В настоящее время для разделения олигомеров используют колоночную адсорбционную хроматографию, тонкослойную хроматографию и гель-проникающую хроматографию. Колоночая адсорбционная хроматография может проводиться в различных режимах элюирования, отличаться способами загрузки образца, подготовки насадки — силикагеля, анализа элюата и масштабностью фракционирования. Впервые колоночная хроматография на силикагеле с использованием диоксана в качестве элюента была применена для исследования молекулярпо-массового распределения олигомеров. [c.244]

    Дифенилоксазол Рибонуклеиновая кислота Тонкослойная хроматография Тонкослойная радиохроматография Тонкослойный электрофорез Изооктилфеноксиполиэтоксиэтанол Фотоэлектронный умножитель Ядерный магнитный резонанс [c.8]

    Перевод гл. 2, посвященной электрохимическим методам анализа, выполнен канд. хим. наук Н.М. Алпатовой, гл. 1, 3, 4 ("Введение", "Колориметрические методы" и "Спектроскопические методы") перевел М.Я. Каабак, гл. 5, 6 ("Термические методы" и "Радиометрические и рентгеновские методы") канд. хим. наук В.А. Заринский, гл.7-10 ("Газовая хроматография", "Тонкослойная и бумажная хроматография и "Нехроматографические методы разделения") перевела А.Н. Горохова и, наконец, перевод гл. 11, посвященной применению цифровых ЭВМ в аналитической химии, выполнил В.А. Гольдберг. [c.7]

Аналитическая химия. Т.1 (2001) -- [ c.48 , c.269 ]

Аналитическая химия (1973) -- [ c.140 , c.530 ]

Аналитическая химия. Кн.2 (1990) -- [ c.0 ]

Руководство по газовой хроматографии (1969) -- [ c.20 ]

Органикум. Практикум по органической химии. Т.2 (1979) -- [ c.105 ]

Аналитическая химия Том 2 (2004) -- [ c.292 ]

Прикладная ИК-спектроскопия (1982) -- [ c.6 , c.202 ]

Начала органической химии Книга первая (1969) -- [ c.41 ]

Методы синтеза с использованием литийорганических соединений (1991) -- [ c.76 ]

Хроматографическое разделение энантиомеров (1991) -- [ c.57 ]

Химия нефти и газа (1996) -- [ c.132 ]

аналитическая химия ртути (1974) -- [ c.61 ]

Аминокислоты, пептиды и белки (1976) -- [ c.231 , c.270 , c.279 ]

Химия углеводов (1967) -- [ c.410 , c.411 , c.412 , c.426 , c.438 , c.493 , c.587 ]

Аналитическая химия (1994) -- [ c.63 ]

Экспериментальные методы в химии полимеров Ч.2 (1983) -- [ c.0 ]

Аналитическая химия кадмия (1973) -- [ c.160 ]

Прикладная ИК-спектроскопия Основы, техника, аналитическое применение (1982) -- [ c.116 , c.202 ]

Методы синтеза с использованием литийорганических соединений (1988) -- [ c.76 ]

Идентификация органических соединений (1983) -- [ c.60 ]

Биоорганическая химия (1987) -- [ c.37 , c.38 , c.58 , c.61 , c.463 ]

Курс аналитической химии (2004) -- [ c.438 ]

Химия справочное руководство (1975) -- [ c.456 ]

Химическое разделение и измерение теория и практика аналитической химии (1978) -- [ c.462 , c.555 , c.566 ]

Равновесия в растворах (1983) -- [ c.165 ]

Фотометрический анализ (1968) -- [ c.166 ]

Общий практикум по органической химии (1965) -- [ c.84 ]

Ионообменные разделения в аналитической химии (1966) -- [ c.214 ]

Органические реагенты в неорганическом анализе (1979) -- [ c.235 , c.237 ]

Экстракция внутрикомплексных соединений (1968) -- [ c.218 ]

Радиохимия (1972) -- [ c.217 , c.218 ]

Основы органической химии (1983) -- [ c.60 ]

Курс органической химии (1979) -- [ c.14 ]

Органическая химия Углубленный курс Том 2 (1966) -- [ c.637 ]

Биохимия фенольных соединений (1968) -- [ c.37 ]

Органикум Часть2 (1992) -- [ c.106 ]

Химический анализ (1979) -- [ c.534 , c.550 , c.554 ]

Аналитическая химия (1975) -- [ c.390 ]

Неорганическая химия (1978) -- [ c.299 ]

Основной практикум по органической химии (1973) -- [ c.60 , c.62 , c.63 ]

Методы количественного анализа (1989) -- [ c.102 ]

Аналитическая химия Часть 2 (1989) -- [ c.342 ]

Иониты в химической технологии (1982) -- [ c.356 , c.364 , c.365 ]

Основы аналитической химии Часть 2 (1979) -- [ c.2 , c.255 , c.287 ]

Фракционирование полимеров (1971) -- [ c.151 ]

Инструментальные методы химического анализа (1989) -- [ c.387 ]

Техника лабораторных работ (1982) -- [ c.307 , c.323 ]

Практические работы по химии природных соединений Издание 2 (1966) -- [ c.37 , c.80 , c.138 , c.162 , c.247 ]

Курс аналитической химии Издание 5 (1981) -- [ c.395 ]

Хроматография неорганических веществ (1986) -- [ c.57 ]

Теоретические основы физико-химических методов анализа (1979) -- [ c.166 ]

Аналитическая химия азота _1977 (1977) -- [ c.169 ]

Курс аналитической химии Издание 4 (1977) -- [ c.251 ]

Руководство по аналитической химии (1975) -- [ c.343 , c.359 ]

Присадки к маслам (1968) -- [ c.134 , c.204 , c.219 , c.223 ]

Основы аналитической химии Кн 3 Издание 2 (1977) -- [ c.33 , c.296 , c.307 ]

Газовая хроматография - Библиографический указатель отечественной и зарубежной литературы (1961-1966) Ч 2 (1969) -- [ c.0 ]

Начала органической химии Кн 1 Издание 2 (1975) -- [ c.39 ]

Жидкостная хроматография при высоких давлениях (1980) -- [ c.9 ]

Методы общей бактериологии Т.3 (1984) -- [ c.0 ]

Биохимия человека Т.2 (1993) -- [ c.30 , c.31 , c.163 , c.164 ]

Биохимия человека Том 2 (1993) -- [ c.30 , c.31 , c.163 , c.164 ]

Биологические мембраны Структурная организация, функции, модификация физико-химическими агентами (2000) -- [ c.228 ]

Химия привитых поверхностных соединений (2003) -- [ c.380 , c.466 ]

Методы органического анализа (1986) -- [ c.143 , c.272 , c.280 , c.288 , c.290 ]

Структура и функции мембран (1988) -- [ c.107 , c.256 , c.257 ]

Методы практической биохимии (1978) -- [ c.70 ]

Химия окружающей среды (1982) -- [ c.613 ]

chem21.info

ТОНКОСЛОЙНАЯ ХРОМАТОГРАФИЯ - это... Что такое ТОНКОСЛОЙНАЯ ХРОМАТОГРАФИЯ?

(ТСХ), вариант хроматографии, основанный на различии в скорости перемещения компонентов смеси в плоском тонком слое (толщина 0,1-0,5 мм) сорбента при их движении в потоке подвижной фазы (элюента). Последняя представляет собой, как правило, жидкость, однако осуществлен и газовый вариант ТСХ. В качестве сорбентов используют мелкозернистые силикагель, Аl2 О 3, целлюлозу, крахмал, полиамид, иониты и др. Суспензиями этих сорбентов покрывают пластинки из стекла, фольги или пластика; для закрепления слоя применяют крахмал, гипс или др. связующие. Пром-стью выпускаются готовые пластинки с уже закрепленным слоем сорбента. Элюентами служат обычно смеси орг. р-рителей, водных р-ров к-т, солей, комплексообразующих и др. в-в. В зависимости от выбора хроматографич. системы (состава подвижной и неподвижной фаз) в разделении в-в осн. роль могут играть процессы адсорбции, экстракции, ионного обмена, комплексообразования. На практике часто реализуются одновременно неск. механизмов разделения.

В зависимости от положения пластинки и направления потока элюента различают восходящую, нисходящую и горизонтальную ТСХ. По технике работы выделяют фронтальный анализ (когда подвижной фазой служит анализируемая смесь) и обычно используемый элюционный вариант. Применяют также "круговую" (когда анализируемый р-р и р-ритель последовательно подаются в центр пластинки) и "антикруговую" ТСХ (когда анализируемый р-р наносится по окружности и элюент перемещается от периферии к центру пластинки), ТСХ под давлением (когда р-ритель под давлением пропускают через слой сорбента, покрытый плотно прижатой полиэтиленовой пленкой), а также ТСХ в условиях градиента т-ры, состава сорбента и т. п. В т. наз. двухмерной ТСХ хроматографич. процесс осуществляют последовательно в двух взаимно перпендикулярных направлениях с разл. элюентами, что увеличивает эффективность разделения. С этой же целью применяют многократное элюирование в одном направлении.

В элюционном варианте на слой сорбента наносят капли (объемом 1-5 мкл) анализируемого р-ра и погружают край пластинки в элюент, к-рый находится на дне герметично закрываемой стеклянной камеры. Элюент продвигается по слою сорбента под действием капиллярных и гравитационных сил; анализируемая смесь перемещается в том же направлении. В результате многократного повторения актов сорбции и десорбции в соответствии с коэф. распределения в выбранной системе компоненты разделяются и располагаются на пластинке отдельными зонами.

После завершения процесса пластинку вынимают из камеры, высушивают и обнаруживают разделенные зоны по собств. окраске или после опрыскивания их р-рами реагентов, образующих окрашенные или флуоресцирующие пятна с компонентами разделяемой смеси. Радиоактивные в-ва обнаруживают авторадиографически (экспонированием на рентгеновскую пленку, наложенную на хроматографии, пластинку). Применяют также биол. и фермента тивные методы детектирования. Полученная картина распределения хрома-тографич. зон наз. хроматограммой (см. рис.).

Хроматограмма, полученная при разделении смеси трех компонентов методом тонкослойной хроматографии.

Положение хроматографич. зон на хроматограмме характеризует величина f-> отношение пути i, пройденного центром зоны i-го компонента от линии старта, к пути l, пройденному элюентом: f = li/l;f1. Величина f зависит от коэф. распределения (адсорбции) и от соотношения объемов подвижной и неподвижной фаз.

На разделение в ТСХ влияет ряд факторов-состав и св-ва элюента, природа, дисперсность и пористость сорбента, т-ра, влажность, размеры и толщина слоя сорбента, размеры камеры. Поэтому для получения воспроизводимых результатов необходимо тщательно стандартизовать условия опыта. Соблюдение этого требования позволяет устанавливать f > с относит. стандартным отклонением 0,03. В стандартных условиях f > постоянна для данного в-ва и используется для идентификации последнего.

Кол-во компонента в хроматографич. зоне определяют непосредственно на слое сорбента по площади зоны (обычно ее диаметр варьирует от 3 до 10 мм) или интенсивности ее окраски (флуоресценции). Используют также автоматич. сканирующие приборы, измеряющие поглощение, пропускание или отражение света, либо радиоактивность хроматографич. зон. Разделенные зоны можно соскоблить с пластинки вместе со слоем сорбента, экстрагировать компонент в р-ритель и анализировать р-р подходящим методом (спектрофотометрия, люминесцентный, атомно-абсорбци-онный, атомно-флуоресцентный, радиометрич. анализ, масс-спектрометрия и т. д.). Погрешность количественного определения обычно составляет 5-10%; пределы обнаружения в-в в зонах -10-3-10-2 мкг (по окрашенным производным) и 10-10-10-9 мкг (с применением люминесцентного анализа).

Достоинства ТСХ: простота, экономичность, доступность оборудования, экспрессность (продолжительность разделения 10-100 мин), высокие производительность и эффективность разделения, наглядность результатов разделения, простота обнаружения хроматографич. зон.

ТСХ применяют для разделения и анализа как орг., так и неорг. в-в: практически всех неорг. катионов и мн. анионов, в т. ч. близких по св-вам ионов благородных металлов, РЗЭ, а также полимеров, лек. ср-в, пестицидов, аминокислот, липидов, алкалоидов и т. д. С помощью ТСХ удобно анализировать микрообъекты (малые кол-ва в-в), оценивать чистоту препаратов, контролировать технол. процессы и состав сточных вод, изучать поведение разл. ионных форм элементов, предварительно подбирать условия для колоночной хроматографии.

Метод предложен Н. А. Измайловым и М. С. Шрайбер в 1938.

Лит.: Волынец М. П., Тонкослойная хроматография в неорганическом анализе, М., 1974; Березкин В. Г., Бочков А. С., Количественная тонкослойная хроматография. Инструментальные методы, М., 1980; Шаршуно-ва М., Шварц В., Михалец Ч., Тонкослойная хроматография в фармации

и клинической биохимии, пер. со словац., М., 1980; Кирхнер Ю., Тонкослойная хроматография, пер. с англ., М., 1981; Беленький Б. Г., Волыпец М. П., Ганкина Э. С., "Ж. Всес. хим. об-ва им. Д. И. Менделеева", 1983, т. 28, № 1, с. 30-34. М. П. Волынец.

Химическая энциклопедия. — М.: Советская энциклопедия. Под ред. И. Л. Кнунянца. 1988.

dic.academic.ru